高效液相色谱(HPLC)和气相色谱(GC)之间的10个相似之处manbetx官方
在早期的文章中讨论了HPLC和GC之间的异化 -气相色谱(GC)manbetx官方和高效液相色谱(HPLC)如何不同?。本文讨论了10个关键特征,这两种技术都是通用的。通过这些功能,您将回顾您对色谱的基本了解,并欣赏两个最流行的分离技术之间的共性。
1.常见的基础
分离混合物的组分,其鉴定和定量是两种技术的常见目的目标。这是通过选择列,移动阶段,固定阶段,探测器和操作条件来实现的。
2.流动阶段的作用
这移动阶段以顺序方式在将样品及其分离的组件运送到分离柱和其分离的组分来发挥重要作用。虽然HPLC和GC功能在相同的原理上,但唯一的区别是HPLC使用液体流动相,而GC使用气体作为载体。
3.样本介绍
GC和HPLC两者都能够分析液体和溶解的固体混合物,但是使用GC常规分析气态混合物。样品引入技术通常通常是常见的。气密注射器足以引入液体样品。对于气体,使用泰德勒袋或自动采样器(手动或自动操作)。在HPLC系统中,流动相位在更高的压力下移动,因此不可能进行直接注射器。注射器用于填充手动样品引入阀中的固定音量环,并且随着阀门位置的变化,环内的整个样品被移动相位携带到列中。当样品数量大时,自动采样器对于无人值守的操作有很大的帮助。
4.固定阶段
基于固定相和移动载体移动相之间的样品组分的分布,将样品组分的分离进行。分布受样品组分和固定相材料之间的物理化学相互作用的影响。例外是凝胶渗透色谱,其中由于洗脱分子的尺寸差异而发生分离。
5.乐队扩大
乐队扩展是对解决损失的主要贡献,因为它导致重叠和合并否则分开的峰值。范认为方程描述了GC或HPLC柱的整体效率,并考虑了移动相的扩散,传质和速度等因素。这种关系有助于理解GC和HPLC分离的频带扩大和优化操作条件。
6.峰值响应
GC和HPLC色谱图看起来相似。在这两种情况下,响应是峰值,并且洗脱化合物的浓度与峰高或峰面积成比例。
主要是HPLC和GC中的四种方法用于定量估计:
- 峰面积的标准化
- 内部标准方法
- 外标方法
- 标准添加方法
7.参考标准
定量分析的基础是对纯参考化合物的样品响应的比较。这些参考工作标准需要通过比较其指定参数来与可追溯到国际公认的标准化机构提供的认证材料的标准进行比较验证。在常规分析中,您需要在指定的操作条件下验证GC或HPLC系统上注射标准的保留时间。
8.常见应用软件
大多数制造商提供普通的HPLC和GC应用软件,因为峰值分析和数据处理很常见。如果系统是从相同的制造商采购的系统,并且获得多用户许可证,这是一个很大的好处。这种软件还有助于建立操作参数和方法排序。
由知名供应商提供的软件的示例是:
- Perkin Elmer-总兼容
- Agilent- ChemStation,EZ Chrom Elite
- Thermo Scientific- Chromleon 7.1
9.与其他技术连字符
GC和HPLC均已成功地用质谱连字,以实现优异的分辨率和高敏感性。这两种技术也已成功耦合FT-IR.在分离的混合物组分上到达结构确认。
10.柱效的表达
HPLC和GC柱的效率以相当于理论板(HETP)的高度表示。该值用于在其使用情况下决定GC和HPLC列的使用寿命。
GC和HPLC都是色谱分析实验室的柱状石头,虽然了解它们之间的差异非常重要,但了解相似性同样重要的是,以便在手中确定特定应用的正确方法。
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