高效液相色谱固定相研究进展:氧化锆高效液相色谱柱
硅基HPLC.列在HPLC实验室中留下了职位。多年来,粒子技术的进步尺寸减少了5μm至2μm,导致UHPLC的开发。进一步介绍核 - 壳技术和单片色谱柱扩展了应用范围,并促进了更大的样本吞吐量。
Zirconia支持的属性
二氧化硅柱的主要限制是在2至8之间的pH范围和温度到环境的可用性。另一方面,氧化锆支持在整个pH范围内表现出运行稳定性,工作温度高达200°C。
路易斯酸
氧化锆或ZrO2是一种氧化物,其中Zr原子充当路易斯酸,即,由于存在空轨道,它接受电子对。与传统的硅胶柱相比,该特性提供了更高的选择性。
吸附能力
与二氧化硅填料相比,吸附容量更大
耐化学性
高耐酸性和碱性溶液。通过在整个可用范围内改变培养基的pH,可以精细地控制碱性和酸性分析物的保留。
阶段类型
有四种基于表面活性的表面化学剂可供使用,这大大提高了分离的选择性和保留率
聚丁二烯包覆氧化锆
该阶段类似于使用C18二氧化硅的反相,但具有以下优点:
- 可用pH范围1 - 13
- 温度稳定性高达200°C
- 疏水性比C18少,适用于涉及胺和碱的分离
氧化锆 - C18
- 用C18基团共价修饰的多孔碳包覆氧化锆颗粒。
- 选择性与传统的C18色谱柱大不相同
- 可在整个pH范围(1–14)内使用,并具有高温能力(高达200°C)
氧化锆-聚苯乙烯
- 用交联聚苯乙烯对多孔氧化锆颗粒进行改性。
- 耐强水溶液(高达100%纯水)
- 操作pH范围1 - 13
- 用于分离疏水化合物和胺
- 不要求离子配对要求
- 与二氧化硅的包装相比,碱性化合物的尾尾减少
- 提供混合模式反相和离子交换分离
氧化锆碳
- 多孔碳包覆氧化锆颗粒提高了极性化合物的保留率
- 高度亲水的表面
- 用于分离异构体和非对映异构体
- 融合融合环芳族化合物的良好保留
柱护理
污染的柱可以恶化峰形,效果保留时间,导致高背压并增加基线噪声。应避免使用25mM磷酸盐以上的浓度,乙酸盐,碳酸盐/碳酸氢盐缓冲液和盐。诸如羧酸,氟化物和磷酸盐的阴离子强烈地吸收氧化锆柱。列再生的推荐步骤是
- 用20:80的乙腈和pH10氢氧化铵的混合物冲洗50柱,其次是10柱水
- 用20:80重复乙腈和0.1米硝酸的混合物,相同柱体积
- 用纯甲醇、乙腈、异丙醇或四氢呋喃冲洗20柱体积。氧化锆高效液相色谱柱将需要至少含20%四氢呋喃的相同溶剂
存储
- 氧化锆HPLC柱不应储存在磷酸盐缓冲液中。建议的存储程序为
- 过夜 - 10卷有机改性剂/水
- 长期储存 - 10体积的pH10氢氧化铵,然后10体积为50:50有机改性剂/水
我们已经看到基于氧化锆的反向阶段提供了良好的选择性和保留选择。柱化学品,pH和温度极值的额外益处有助于应用的多功能性。随后的单片固定相包装的文章将向您介绍静止阶段的进一步进展。
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[…]开辟新的应用领域。核壳填料、整体式填料和氧化锆填料的优点已在前面的[…]中讨论过
亲爱的Deepak博士
我认为这是高效液相色谱分析的一个重大突破。请给我每一个的报价。我将非常感激。非常感谢您的见解。
此致
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