HPLC流动相的理想性质是什么?
移动阶段被恰当地称为生命线高效液相色谱法系统。它起着将样品通过分离柱输送到检测器进行分离组分鉴定的重要作用。
流动相很少是单一溶剂。它由水与有机溶剂的组合,水缓冲液与极性溶剂或有机溶剂按所需比例的混合物组成。常用的两种操作模式是:
权力平等主义的模式-在等晶模式下,流动相的组成在整个分析过程中保持不变。E,混合物中溶剂的比例是预先确定的,并在分析时保持不变
梯度洗脱,通过在预定模式下运行分析程序,由软件改变组成,在运行结束时,溶剂的比例与初始比例不同。
使用不同溶剂混合物的目的是实现所需的流动相极性,使样品完全混溶,并控制样品组分与固定相的相互作用,以在尽可能短的时间内达到所要求的分离组分峰的分辨率。
为了达到所需的目标,流动阶段应具备以下基本特征:
- 样品应在流动相中完全溶解。任何不溶性都会导致流动限制。进样前一定要检查样品在流动相中的溶解度。
- 流动相组分应是非危险和无毒的。它们不应对操作者构成任何健康危害。
- 流动相对样品成分和固定相应是惰性的。任何反应都可能导致不溶性悬浮液的形成,从而导致柱堵塞。
- 流动相在通过检测器时不应给出自己的响应。换句话说,检测器信号应该只反映样品组分的响应。然而,这不适用于体积性质检测器,如折射率检测器,它响应包含洗脱化合物的流动相折射率的整体变化。
- 流动相应该是负担得起的,使用的溶剂比例应该使分析在经济上可行。
为了得到一致性的结果,必须将同一来源的特定纯度的溶剂混合,并采用相同的溶剂离线混合技术避免因加热引起的误差混合误差。在使用缓冲液的情况下,总是在用有机相弥补最后的体积之前调整水相的pH值。
高效液相色谱技术在各个领域都有广阔的应用前景。操作条件的控制,包括流动相的一致性,将确保结果的重复性。
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