HPLC的一般应用基于溶质-固定相相互作用分类
高效液相色谱法根据流动相和固定相中溶质之间的相互作用，将其分为四类。本文简要讨论了高效液相色谱技术的分类:正相色谱、反相色谱、离子交换色谱和尺寸排阻色谱HPLC免费课程。本文将涵盖这些类中的一些主要应用程序类型。
正相色谱法
固定相是硅基的，上面覆盖着极性基团。流动相本质上是非极性的。分离分子的洗脱顺序为非极性、弱极性、极性。
- 正相色谱分离含不同官能团的化合物比反相色谱分离效果好，保留大部分极性基团。留存率的下降顺序如下:
羧酸>酰胺>醇>酮>醛>醚>芳烃>烯烃>饱和烃
- 同分异构体的分离
亲水化合物被保留在固定的极性相上，并从疏水化合物中分离出来。
反相色谱法
大多数应用是在制药，生命科学，食品工业等，都涵盖在反相分离。惰性硅基固定相被非极性分子所覆盖。最常用的是共价结合的十八烷基二氧化硅(ODS - c18)，其次是辛基(C8)和己基(C6)。流动相的极性比固定相大。溶质分子按疏水性增大或极性减小的顺序被洗脱。
离子交换色谱法
离子交换色谱由二氧化硅载体组成，其上带电的阴离子或阳离子基团被固定，以保留来自流动相的相反带电分子。季盐是强阴离子交换剂，胺是弱阴离子交换剂，而强磺酸和羧酸是弱阳离子交换剂。
该技术主要用于从蛋白质、药物和血液、尿液等生物液体中的代谢物等混合物中分离纯化合物，从组织中提取酶，分离有机酸和碱性化合物混合物。
尺寸排阻色谱法
这类色谱分离是独特的，在某种意义上，分离不是基于洗脱化合物和固定相之间的化学相互作用。相反，它是基于洗脱分子的大小差异和它们渗透固定相孔隙的能力。大分子首先被洗脱，然后小分子被困在固定相的孔隙中，然后洗脱。
凝胶过滤色谱法用于分离水溶性聚合物。凝胶渗透色谱法是分析有机可溶聚合物分子量分布的常用方法。
本文简要介绍了不同的高效液相色谱技术的应用领域。这一领域正在不断扩大，在制药、生物技术、食品、法医学等领域可以找到更多的应用。色谱柱技术和自动化的进步为高效液相色谱分析的范围做出了重大贡献，应用的数量正以惊人的速度增长。
请留下您的意见和建议。
反应