保护柱是什么?它们在高效液相色谱分析中有什么好处?

保护柱是什么?它们在高效液相色谱分析中有什么好处?
高效液相色谱警卫队列
高效液相色谱警卫队列

有效运作高效液相色谱系统取决于流动相的自由和样品从化学杂质或固体悬浮液。HPLC流动相的处理和使用注意事项讨论了流动相制备和使用过程中应采取的措施。样品过滤的重要性讨论了清洁样品注射的好处。

高效液相色谱柱是高效液相色谱系统的关键组成部分小心处理和保护。频繁更换列是很昂贵的,所以您的目标应该是最大限度地延长列的使用寿命,以便每次您都能获得所需的准确性和结果的一致性。

的色谱行为高效液相色谱法由于杂质和悬浮液的逐渐积累,色谱柱在使用过程中开始下降。流动相或样品中大于2μm的颗粒开始沉积在柱的入口熔块上,从而影响流动的均匀性。较小的颗粒导致反压力增加,因此它们开始阻塞固定相中的流动路径。

污染物的性质

  • 高度保留的化合物,如脂肪酸在反相分离
  • 不可逆保留的化合物,如在样品提取时未完全去除的残余蛋白质。生物体液中蛋白质的去蛋白质化强烈推荐使用高效液相色谱分析。
  • 颗粒杂质可能是由于样品未过滤,系统部件(如泵或喷油器中的密封件)磨损而释放的微粒。
  • 由于柱内残余缓冲液的干燥而形成结晶沉积。用高效液相色谱级水洗柱后或缓冲溶液防止这种盐沉积的形成。

什么是守卫纵队?

保护柱是安装在注入器和分析柱之间的保护柱或保护筒。它的作用是除去杂质和悬浮固体到达分析柱。通常它的长度约为2厘米,内径4.6毫米。保护柱填充了大约40 μm大小的颗粒,提供可以忽略不计的压降。

保护列的理想特性

  • 保护柱最好具有与分析柱相同的填料,以消除分离并发症
  • 保护柱的内部内径应与分析柱相似,以最大限度地减少背压。较短的保护柱长度是可取的,但它应该足够长,以防止强残留的化合物到达主柱
  • 面对喷射器的熔块应该是可拆卸的,通过去除约2mm的材料并填充新鲜材料进行清洗
  • 与可填充保护柱相比,一次性盒式保护柱使用方便、经济。

保护柱需要定期更换,但通过观察色谱行为的变化,如背压增加、峰增宽和峰保留时间的变化,中间变化是必要的。然而,改变的频率可以根据样品的化学成分、是否存在高度保留或不可逆保留成分、注射量或注射次数来决定。

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反应

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  1. 对于天然气分析仪,是否需要使用这种类型的柱(GUARD柱)。

    谢谢兄弟。

    1. 嗨,哈桑,
      在本文中,我们讨论了高效液相色谱保护柱。对于GC分析仪或天然气分析仪,从来没有遇到过使用保护柱。保护塔的目的是防止固体杂质或化学杂质到达主塔。在高效液相色谱分析中,如果样品或流动相没有被充分过滤,固体颗粒就会进入主柱,但在基于GC技术的分析中,这种问题很少遇到。采用预防技术可有效地克服高浓度或其他杂质使塔超载的问题。

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