什么是高效液相色谱?

什么是高效液相色谱？

需要简单回答的基本问题是”什么是高效液相色谱法？”简单地说，高效液相色谱是一种分析技术，用于分离有机混合物的成分，当这些化合物是不挥发的，热不稳定的，有相对较高的分子量。

被称为流动相的液体载流携带进样通过分离柱进入检测器。在分离柱中，各组分根据物理化学相互作用进行分离，洗脱顺序以相互作用为基础。检测器根据光的吸收或折射率的变化，电化学/电导率的变化，或简单地根据洗脱分子的大小分布来检测分离的组分。

探测器的响应是峰的形状，其面积与存在的量成正比。输出由操作软件监控和评估，该软件不仅计算响应，还支持操作参数，如进样量，进样顺序，检测波长，洗涤周期等。

如今，可用软件的先进功能使得操作非常方便用户。用户花费的大部分时间用于流动相准备、缓冲液和标准液的准备以及记录条目。

分离科学极大地促进了分析化学的发展和理解，并更好地控制了消费品（如药品、食品和饮料、聚合物、环境监测等）的质量。主要归功于色谱技术，尤其是HPLC。

介绍高效液相色谱及其部件

高效液相色谱法（HPLC）是一种流行且通用的技术，可为复杂有机样品的成分分离、鉴定和定量提供价格合理的解决方案。乍一看，复杂模块的组装和一堆管子可能会吓到你。然而，在深入了解每个成分的作用后，谜团将开始揭开，高效液相色谱系统将成为一个用户友好的设备，如果妥善处理，将确保分析后结果的最高准确性和可靠性。

这篇关于“高效液相色谱简介”的PowerPoint演示文稿简要介绍了HPLC的组成部分。了解各个组成部分以及每个组成部分如何对分析的整体可靠性做出贡献是很重要的。您提高的舒适度将使您意识到HPLC是一个简单易用的系统，并有无限的应用前景。

在本系列的最后一张幻灯片中高效液相色谱法，你会发现有用的链接在一个高级高效液相色谱证书课程．我们邀请您加入我们的项目，并利用这个机会通过参加论坛和网络研讨会与我们的专家互动。看一下高效液相色谱色谱PPT如下所示。

这些部分的不同组合是:

·泵

·探测器

·喷油器根据应用程序产生无限数量的配置

你需要对HPLC系统的各个部分有很好的了解高效液相色谱原理以产生最高可靠性的数据。对每个组件功能的概念理解将增加您使用HPLC系统的舒适度，并确保长期使用高度依赖输出数据。

液相

液相以恒定的速率被泵送到由固定相填充的色谱柱中。在进入色谱柱之前，分析样品被注入到载流中。

当到达色谱柱时，根据分析物分子和固定相之间的物理化学相互作用，样品组分被选择性地保留。

流动相

流动相用于将样品输送至系统。流动相的基本标准是对样品组分的惰性。通常使用纯溶剂或缓冲液组合。流动相应无颗粒杂质，并在使用前脱气。

流动相储层

这些是用于流动相存储和运输的惰性容器。一般采用透明玻璃瓶，便于肉眼检查容器内的移动相位。内部装有不锈钢颗粒过滤器，用于去除流动相中的颗粒杂质(如有)。

泵

流动相流速的变化会影响样品组分的洗脱时间并导致误差。泵在恒定的压力下提供流动相到柱的恒定流动。

喷油器

喷射器用于提供恒定体积的样品注入流动相流。注射的惰性和重现性是保持高水平准确性所必需的。

列

柱是装有固定相的不锈钢管。它是一个至关重要的部件，应该根据供应商的说明进行适当的维护，以确保运行后的重现性和分离效率。

柱状烘箱

在分析运行过程中温度的变化会导致分离洗脱组分保留时间的变化。柱式烘箱利用空气循环来保持恒定的柱温。这保证了流动相通过色谱柱的恒定流速。

探测器

检测器对由色谱柱分离的组分给出特定的响应，并提供所需的灵敏度。它必须独立于流动相组成的任何变化。大多数应用需要UV-VIS检测，尽管基于其他检测技术的检测器现在也很流行。

数据采集与控制

现代高效液相色谱系统是基于计算机和软件控制操作参数，如流动相组成、温度、流速、进样量和顺序，以及输出的采集和处理。

专业版本

专门的高效液相色谱系统可能也有溶剂选择阀、真空脱气器、自动进样器、柱开关、柱前或柱后衍生化和馏分收集器。这些都在我们的在线认证项目上详细介绍了HPLC - HPLC证书课程。

信息图:运行高效液相色谱到底需要什么?

任何在实验室工作的人都可能使用高效液相色谱法在某个时候。从您完成毕业、毕业后、博士学位或开始在某个行业工作时起，您可能就必须依靠HPLC来回答一些重要问题。我们大多数人都相信，能够运行软件并注入样本就足够了。

与这个神话相去千里的是，HPLC操作需要的不仅仅是软件和硬件的理解和知识。事实上，这些只是大局的一小部分。在高效液相色谱实验室中，您平均每天只花一小部分时间运行系统。大部分时间将花在准备样本、移动相、缓冲区、填写日志和各种表格和格式上。

该信息图旨在指导你通过一系列的18个逻辑步骤，绘制出实现学习目标的路径。系统的方法将提供一个完整的包，以确保您的投资和时间的价值。阅读我们的18步高效液相色谱简化指南，开始吧!

高效液相色谱-新时代的分析技术

分析化学正成为化学专业学生的热门职业选择。显而易见的原因是，它应用化学知识来了解材料的化学性质。它为建立供我们消费的自然资源和合成工业产品的质量作出了宝贵的贡献。这些资源的质量和它们的一致性在很大程度上取决于分析化学家在他们的实验室中进行的精确测定。

一般来说，色谱法和高效液相色谱法在研究和产品开发方面做出了显著的贡献。HPLC在制药、食品、生化研究、合成聚合物、生物分子研究和环境监测等领域有着广泛的应用。HPLC的范围正在以惊人的速度扩大，许多新的应用几乎每天都在著名的研究杂志上报道。

本文重点介绍了一些最近的发展，这些发展有助于在现代实验室中大规模接受HPLC作为一种流行技术。

经营规模

高效液相色谱法可以在很大的浓度范围和分子量范围内分析样品。通过使用不同的柱尺寸和操作模式，分析的样本量从皮克到克级不等。在合成聚合物和大型生物分子领域的发展已经导致了高效液相色谱处理低分子量样品的能力，分子量在数百万。

固定相技术进展

硅基柱至今仍是固定相的支柱。然而,单相柱，锆石基础阶段以及基于核心shell-based技术有助于更快的分析速度，更宽的操作温度和压力范围，并在扩大的pH范围的介质研究。

探测器的选择

高效液相色谱法根据洗脱化合物的特性提供了几种检测方法。常用的选项有紫外检测器、RI检测器、光电二极管阵列检测器、荧光检测器、电导率检测器、光散射检测器和质量选择性检测器。LC-MS-MS是一种高灵敏度的技术，在复杂混合物分析中提供分析解决方案，在生物分析研究和农产品中农药残留研究中提供低限度检测。

流动相的选择

反相色谱法是最流行的操作方式，利用极性溶剂作为流动相。然而，使用不同极性溶剂的组合、缓冲液和等晶/梯度操作模式，在分解具有紧密间隔峰的复杂分子混合物时是有用的。

高效液相色谱技术提供的分析选项有助于其日益普及。现代实验室有几个24小时运行的高效液相色谱系统。该技术的结构化学习作为一名分析化学家，可以为你的职业发展贡献价值。

高效液相色谱术语表

如果您还不熟悉这项技术，术语表将帮助您理解术语。