离子对色谱-用反相高效液相色谱分离高极性分子的一个可行的选择

离子对色谱帮助使用流行的反相色谱分离带电分析物。当改变流动相比或改变固定相时，离子对试剂增加峰形和保留时间的作用不大。

这项技术是戈登·希尔博士在1973年发明的。离子配对试剂在非极性链的末端有一个离子端官能团。将试剂加入到流动相中，并给予足够的时间使其与色谱柱达到平衡。链的非极性端与非极性固定相紧密相连，而带电端伸出流动相。流动相中电荷相反的离子片段被试剂上的电荷固定，导致样品分子和试剂之间的中性离子配对。这有助于在反相中选择性地保留对分析物的电荷高效液相色谱法．

离子交换色谱已经存在多年，但离子对色谱的引入提供了几个优势:

• 缓冲液的简单制备
• 广泛的碳链长度选择，以改善保留和分离
• 显著缩短分离时间
• 同时分离电离和非电离分子
• 结果重现性高
• 改善峰形状

酸性样品的分析是通过向流动相中加入四丁基氯化铵等季铵盐进行的

RCOONR ` 4\ (RCOONR ` 4\)

同样，带负电荷的试剂，如烷基磺酸，可以用来选择性地保留带正电荷的离子碱

RNH_3^+ + R ' so_3 ^- RNH_3O_3S-R ' \

离子对试剂使用注意事项:

• 选择的离子对试剂应在选择的分析紫外或荧光波长区域缺乏吸收
• 在使用离子对试剂时，应精确控制流动相组成和温度，避免梯度洗脱
• 留出足够的时间使流动相与色谱柱达到平衡，使流动相或温度的变化最小化
• 使用离子对试剂的色谱柱应专门用于此类分析，因为即使在大量冲洗后也很难完全冲洗出离子对试剂

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