固定相粒径对HPLC分离的影响

固定相粒径对HPLC分离的影响
单分散球形图副本
高效液相色谱固定相粒子

固定相的柱长和粒径对分离效率和色谱柱背压起着至关重要的作用高效液相色谱柱。较长的色谱柱和较小的颗粒尺寸有助于提高分离效率,但以增加色谱柱背压为代价。分类高效液相色谱柱尺寸分离涵盖高效液相色谱根据色谱柱长度将分离分为四种主要技术。

粒径是指固定相颗粒的平均直径。较小的颗粒可提高分离效率。

\(N=\frac{L}{2dp}\)

哪里

N=柱效率

L=列长度

dp=颗粒直径

其中L为柱长,dp为粒径。然而,为了提高分离效率,必须付出增加塔背压的代价。

在寻求提高分离效率的过程中,需要将粒径减小到2µm以下,这被证明是一项技术挑战。这带来了UHPLC时代以及随后引入的核壳柱填料对高效液相色谱法的挑战,该法与UHPC具有相似的优点,但柱背压水平降低。

在这一点上,区分粒度和孔径是很重要的。在显微镜检查下,可以看到球形二氧化硅颗粒的表面覆盖着微观孔隙。粒径越小,颗粒的表面积越大。分离效率取决于比表面积,随着粒径的减小而增大。

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